Influenza aviaria e malattia di Newcastle: procedure di prova
Ultimo aggiornamento: 05/05/2022
Il Centro di referenza nazionale/Laboratorio di referenza europeo (EURL) per l’influenza aviaria e la malattia di Newcastle effettua analisi accreditate sierologiche e virologiche, di tipo classico e biomolecolare, volte ad identificare e a caratterizzare ceppi virali di influenza aviaria (AI) e avian paramyxovirus (APMV).
Presso il laboratorio vengono inoltre svolte da diversi anni analisi di tipo biomolecolare di nuova generazione (Next Generation Sequencing – NGS), per analizzare in modo più approfondito le caratteristiche dei campioni diagnostici in caso, ad esempio, di sospette coinfezioni e per indagini epidemiologiche.
Di seguito sono elencate le procedure di prova per l’identificazione e la caratterizzazione dei sottotipi principali di AIV e APMV e le relative dichiarazioni di validazione. Il personale del laboratorio è inoltre a disposizione per fornire assistenza sulle metodiche in elenco e ulteriori protocolli.
| Procedura di prova | Documenti | |
|---|---|---|
| Ricerca degli anticorpi verso virus influenzali di tipo “A” mediante agar gel immunodiffusione (AGID) (rev. 01 – 01/12) | PDP IMM 063 | Dichiarazione di validazione |
| Ricerca degli anticorpi anti-emoagglutinina (anti-HA) dei virus dell’Influenza aviaria mediante prova di inibizione dell’emoagglutinazione (rev. 06 – 07/21) | PDP IMM 064 | Dichiarazione di validazione |
| Ricerca degli anticorpi nei confronti del virus della malattia di Newcastle mediante inibizione dell’emoagglutinazione (rev. 01 – 02/13) | PDP IMM 065 | Dichiarazione di validazione |
| Ricerca di anticorpi verso il virus dell’influenza tipo A mediante saggio immunoenzimatico (ELISA) nel siero di sangue di specie aviare (rev. 03 – 07/21) | PDP IMM 116 | Dichiarazione di validazione |
| Isolamento e tipizzazione preliminare dei virus influenzali aviari mediante isolamento in uova embrionate (rev. 09 – 08/21) | PDP VIR 005 | Dichiarazione di validazione |
| Isolamento e diagnosi differenziale del virus della malattia di Newcastle (NDV) (rev. 08 – 08/21) | PDP VIR 007 | Dichiarazione di validazione |
| Preparazione del campione ed estrazione degli acidi nucleici per la rilevazione con metodi molecolari del virus dell’Influenza Aviaria (AIV) e del paramyxovirus aviario di tipo 1 (APMV-1) (rev. 00 – 02/22) | ALL PDP 1000 | – |
| Rilevazione del virus dell’influenza aviaria (tipo A) mediante real-time RT-PCR (Heine et al., 2015; Laconi et al., 2020) (rev. 07 – 02/22) | PDP VIR 018 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione del virus APMV-1 (Avian Paramyxovirus Tipo 1) mediante reverse transcriptase PCR e sequenziamento Sanger (rev. 05 – 03/22) | PDP VIR 063 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione virus euroasiatici dell’influenza aviaria sottotipo H5 mediante one step RT-PCR e sequenziamento Sanger (rev. 03 – 02/19) | PDP VIR 125 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione virus euroasiatici dell’influenza aviare sottotipo H7 mediante one step RT-PCR e sequenziamento Sanger (rev. 03 – 02/19) | PDP VIR 126 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione virus euroasiatici dell’Influenza Aviaria Sottotipo H5 mediante reverse transcriptase Real Time PCR (rev. 02 – 02/19) | PDP VIR 143 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione virus euroasiatici dell’Influenza Aviaria Sottotipo H7 mediante reverse transcriptase Real Time PCR (rev. 02 – 02/19) | PDP VIR 144 | Dichiarazione di validazione |
| Rilevazione del paramyxovirus aviario di tipo 1 (APMV-1) mediante rRT-PCR (rev. 02 – 06/20) | PDP VIR 151 | Dichiarazione di validazione |