L’U.O. Micoplasmi esegue l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp. su diverse matrici biologiche (tamponi tracheali, tamponi cloacali). Questa analisi permette – tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi – l’isolamento di diversi micoplasmi rilevanti per il settore avicolo industriale.

L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di una o più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). L’utilizzo di tale metodica ha consentito di evidenziare la co-presenza di diversi micoplasmi nel settore avicolo industriale o nelle specie minori (selvaggina da piuma), ponendo nuovi quesiti sul possibile ruolo epidemiologico di queste specie. Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari tramite sequenziamento di geni target, può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore avicolo.

L’U.O. Micoplasmi ha messo a punto le Real-Time PCR per la ricerca di MG e MS. Tali metodiche, accreditate secondo la norma ISO 17025, consentono una tempestiva diagnosi in corso di piani di monitoraggio o conferma di sospetto in gruppi di animali sintomatici. Inoltre, queste metodiche sono eseguite nell’ambito dei controlli previsti dal Regolamento (UE) 2019/2035.

Diverse metodiche biomolecolari per la genotipizzazione di MG e di MS vengono eseguite presso l’U.O. Micoplasmi. Tali metodiche possono prevedere un approccio one-target (es., gene mgc2 di MG, gene vlhA di MS) oppure multi-target (MLST-Multilocus Sequence Typing).

È inoltre possibile fare diagnosi indiretta di micoplasmosi tramite la ricerca anticorpi nei confronti di MG, MS e M. meleagridis (MM) con test ELISA eseguiti presso l’U.O. micoplasmi. Queste prove sono accreditate secondo la norma ISO 17025 e vengono eseguite nell’ambito dei controlli previsti dal Regolamento (UE) 2019/2035.

Il Laboratorio di Virologia speciale e sperimentazione della SCS6 esegue la ricerca anticorpi per MS, MG e MM anche con metodica SAR (Sieroagglutinazione Rapida).

La sezione territoriale di Treviso (SCT2) esegue la ricerca anticorpi per MS e MG con metodica ELISA e SAR.

Tali metodiche rapide ed economiche possono essere utili nello screening di popolazioni animali per la valutazione della presenza e/o prevalenza di questi patogeni, per la valutazione dell’efficacia di piani vaccinali o di piani di eradicazione.

L’U.O. Micoplasmi esegue l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp. su diverse matrici biologiche (tampone nasale, tampone auricolare, tampone oculare, BAL, tamponi vaginale, latte singolo o di massa). Questa analisi permette – tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi – l’isolamento di diversi micoplasmi rilevanti per il settore bovino italiano (M. bovis, M. dispar, M. bovigenitalium).

L’identificazione di specie dei campioni sospetti positivi avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore.

Inoltre, per la ricerca di M. bovis è disponibile una metodica biomolecolare (Real-Time PCR) che può essere eseguita su diverse matrici biologiche (tipicamente in animali vivi, da tampone nasale o lavaggio broncoalveolare – BAL). Questa analisi viene eseguita dai laboratori della SCT3 – Laboratorio Diagnostica clinica nella sede centrale di Legnaro (Padova) ed è normalmente richiesta per la diagnosi in animali con patologia clinica in atto.

È possibile anche ricorrere alla diagnosi indiretta mediante ricerca di anticorpi specifici nei confronti di M. bovis in campioni di siero o di latte attraverso la metodica ELISA. Questa analisi è particolarmente indicata per evidenziare la presenza e/o la prevalenza di infezione nella mandria, e viene eseguita presso il Laboratorio di sierologia e malattie pianificate (SCT3).

L’U.O. Micoplasmi esegue l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp. su diverse matrici biologiche (tampone nasale, tampone congiuntivale, liquido sinoviale). Questa analisi permette – tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi – l’isolamento di micoplasmi rilevanti per il settore suino italiano (M. hyopneumoniae, M. hyorhinis, M. hyosynoviae). L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore.

È disponibile una metodica biomolecolare (multiplex Real-Time PCR) per la ricerca simultanea di M. hyopneumoniae e M. hyorhinis che può essere eseguita su diverse matrici biologiche (tampone nasale, tampone congiuntivale, liquido sinoviale). Questa analisi viene eseguita presso il Laboratorio di Patologia e Benessere della specie suina della Sezione Territoriale di Pordenone (SCT4) e può essere richiesta per effettuare diagnosi in casi di patologia clinica in atto.

Inoltre, è possibile effettuare una diagnosi indiretta mediante ricerca di anticorpi specifici nei confronti di M. hyopneumoniae in campioni di siero mediante metodica ELISA.c

L’U.O. Micoplasmi esegue l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp. su diverse matrici biologiche in funzione del tipo di sintomatologia manifestata dagli animali (tampone nasale, latte singolo o di massa, tampone congiuntivale, liquido sinoviale). Questa analisi permette – tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi – l’isolamento di micoplasmi rilevanti per il settore ovicaprino italiano (M. ovipneumoniae, M. agalactiae, M. mycoides subsp. capri, M. capricolum subsp. capricolum, M. putrefaciens).

L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore.

In caso di sospetto isolamento di micoplasmi appartenenti al cluster Mycoides o di agenti eziologici di Agalassia Contagiosa gli isolati vengono inviati per la conferma diagnostica ai rispettivi Centri di Referenza Nazionali.

Il Laboratorio di medicina aviare della sezione territoriale di Verona (SCT1) fornisce un servizio di diagnostica anatomopatologica che permette di confermare/escludere sospetti di malattia tramite ricerca diretta ed indiretta dei patogeni sospettati. La U.O. Micoplasmi offre un panel di test diagnostici per la diagnosi di Mycoplasma spp. da diverse matrici biologiche raccolte in campo o in sede necroscopica.

L’esame colturale per Mycoplasma spp. permette, tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi, l’isolamento di micoplasmi rilevanti per il settore avicolo industriale.

L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). L’utilizzo di tale metodica ha consentito di evidenziare la co-presenza di diversi micoplasmi nel settore avicolo industriale o nelle specie minori (selvaggina da piuma), ponendo nuovi quesiti sul possibile ruolo epidemiologico e patogeno di queste specie. Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es. sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore avicolo.

L’U.O. Micoplasmi ha messo a punto le Real-Time PCR per la ricerca di MG e MS. Tali metodiche, accreditate secondo la norma ISO 17025, consentono una tempestiva diagnosi in corso di piani di monitoraggio o conferma di sospetto in gruppi di animali sintomatici. Inoltre, queste metodiche sono eseguite nell’ambito dei controlli previsti dal Regolamento (UE) 2019/2035.

Diverse metodiche biomolecolari per la genotipizzazione di MG e di MS vengono eseguite presso l’U.O. Micoplasmi. Tali metodiche possono prevedere un approccio one-target (es., gene mgc2 di MG, gene vlhA di MS) oppure multi-target (MLST-Multilocus Sequence Typing).

Per la diagnosi post mortem di infezione da M. bovis o da altre specie di micoplasmi (per cui non esistono attualmente metodiche a target predefinito) IZSVe mette a disposizione un panel di test diagnostici per la ricerca di Mycoplasma spp. da diverse matrici biologiche. I campioni diagnostici raccolti in sede necroscopica (tamponi bronchiali, polmone, liquidi articolari, liquidi di lavaggio dell’apparato respiratorio -TL e/o BAL-), possono essere collezionati e destinati all’esame colturale presso la U.O. Micoplasmi (SCT1). Tale laboratorio ha sviluppato expertise in primis in campo avicolo e successivamente nei rimanenti settori zootecnici (bovino, piccoli ruminanti, suino).

L’U.O. Micoplasmi è in grado di eseguire l’identificazione di specie da isolati batterici tramite l’utilizzo di un test molecolare (16S rRNA-PCR-DGGE), capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) o di patogeni considerati esotici (PPCB-Pleuropolmonite contagiosa bovina).

In caso di sospetto isolamento di micoplasmi appartenenti al cluster Mycoides gli isolati vengono inviati per la conferma diagnostica al Centro di Referenza Nazionale.

La combinazione della metodica colturale e molecolare consente di investigare la presenza o co-presenza di micoplasmi rilevanti per il settore bovino, fornendo importanti informazioni sull’epidemiologia e sulla patologia delle micoplasmosi nella specie bovina. Infine, l’U.O. Micoplasmi sta allestendo in via sperimentale ulteriori metodiche biomolecolari (MLST- Multi Locus Sequence Typing-) per la genotipizzazione M. bovis al fine di incrementare le conoscenze epidemiologiche di questo micoplasma in Europa.

È disponibile inoltre un esame immunoistochimico per M. bovis, che può essere eseguito su sezioni istologiche d’organo raccolte in sede autoptica. Questa analisi permette di visualizzare la presenza dell’antigene in associazione alle lesioni istologiche a carico dei tessuti oggetto di indagine e può essere richiesta al Laboratorio di istopatologia (SCS3).

La metodica biomolecolare (Real-Time PCR) per la ricerca di M. hyopneumoniae e M. hyorhinis può essere eseguita su diverse matrici biologiche (polmone, liquido articolare, liquido pericardico, tampone oculare) raccolte in sede autoptica, al fine di confermare o escludere il sospetto diagnostico.

Sulle medesime matrici l’U.O. Micoplasmi è in grado di eseguire l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp..

Questa analisi permette – tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi – l’isolamento di micoplasmi rilevanti per il settore suino italiano (M. hyopneumoniae, M. hyorhinis, M. hyosynoviae). L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite il metodo 16S rRNA-PCR-DGGE, capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore.

La combinazione della metodica colturale con quella molecolare consente di rilevare la presenza o co-presenza di specie di micoplasmi rilevanti per il settore suinicolo, fornendo importanti informazioni sull’epidemiologia e manifestazione clinico-patologica delle micoplasmosi in questa specie.

L’U.O. Micoplasmi esegue l’esame colturale per la ricerca di Mycoplasma spp. su diverse matrici biologiche collezionabili in sede autoptica (polmone, liquido articolare, mammella). Questa analisi permette, tramite l’utilizzo di una combinazione di terreni selettivi, l’isolamento di micoplasmi rilevanti per il settore ovicaprino italiano (M. ovipneumoniae, M. agalactiae, M. mycoides subsp. capri,  M. capricolum subsp. capricolum, M. putrefaciens)

L’identificazione di specie degli isolati avviene tramite 16S rRNA-PCR-DGGE, tecnica capace di visualizzare nel medesimo campione la presenza di più specie-generi appartenenti alla classe Mollicutes (Mycoplasma spp., Acholeplasma spp. e Ureaplasma spp). Inoltre tale metodica, se associata ad ulteriori approfondimenti biomolecolari (es., sequenziamento del gene 16S rRNA), può consentire l’identificazione di nuove specie di Mollicutes (patogeni emergenti) che potrebbero avere rilevanza nel settore.

In caso di sospetto isolamento di micoplasmi appartenenti al cluster Mycoides o di agenti eziologici di Agalassia Contagiosa gli isolati vengono inviati per la conferma ai rispettivi Centri di Referenza Nazionali.